原核表达IPTG诱导原理在一楼也有哪些问题？

最近，我正在做原核表达诱导。现在我将总结原核表达IPTG诱导的原理。同时，在一楼有一些问题。欢迎大家！ ！ ！

乳糖（Lac）算子理论：当葡萄糖和乳糖同时存在时，细菌会优先使用葡萄糖。当葡萄糖用完时，细菌会经历生长停滞期并开始使用乳糖，从而会出现细菌。次级生产曲线”。

乳糖操纵子的基因表达受蛋白质和CAP（

激活蛋白（也称为CRP，cAMP受体蛋白）的双重调控。

乳糖操纵子的结构：

Plac I和Tlac I分别是编码乳糖抑制剂蛋白的启动子和终止子，“ i”代表抑制剂，其结构也可以简化如下：

首先，让我们谈谈受阻蛋白的调控原理：当培养基中没有乳糖时，受阻蛋白将与操纵子O结合，并阻止RNA聚合酶与启动子P的进一步反应。

IPTG可以与阻断蛋白结合，进一步促进转录反应。

CAP的调节原理：它可以增强转录活性，从而使细菌能够合成足够的酶来利用乳糖

葡萄糖→→降解产物（可抑制腺苷酸环化酶活性）

ATP→→cAMP（需要腺苷酸环化酶）

以上两个反应导致：当存在葡萄糖时葡萄糖诱导剂原核表达IPTG诱导原理在一楼也有哪些问题？，cAMP浓度低；仅当葡萄糖被消耗时，cAMP浓度才会增加，并形成CAP-cAMP复合物（与lac操纵子CAP结合位点结合），从而促进转录；

同时附加其特定的归纳原理：

1.大肠杆菌的乳糖操纵子（元件）包含三个结构基因Z，Y和A，分别编码半乳糖苷酶，通透酶和乙酰转移酶。另外，有一个操作序列O，一个启动子序列P和一个调节基因I。I基因编码一个阻遏蛋白，该蛋白与O序列结合，从而操纵子（元）被阻遏并关闭。在起始序列P的上游还有一个分解代谢（代谢物）基因激活蛋白（CAP）结合位点。P序列，O序列和CAP结合位点一起构成了lac操纵子的调节区。这三种酶的编码基因受同一调控区域调控，实现基因产物的协同表达。

2.

在没有乳糖的情况下，紫胶操纵子（元）处于抑制状态。此时，在PI起始序列的控制下由I序列表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合，这阻止了RNA聚合酶与P序列结合并抑制了转录起始。当存在乳糖时，可以诱导紫胶操纵子（元）。在这种操纵子（元）系统中，真正的诱导剂本身不是乳糖。乳糖进入细胞并被β-半乳糖苷酶催化并转化为异乳糖。后者作为诱导物分子，与阻遏蛋白结合并改变蛋白构象，从而导致阻遏蛋白从O序列解离和转录。异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）具有与异乳糖相同的作用。它是一种非常强大的诱导剂，它不被细菌代谢葡萄糖诱导剂，并且非常稳定，因此在实验室中得到了广泛的应用。